• lab-217043_1280

Kaip išvalyti taršą ląstelių gamykloje

Kai ląstelėse auginame

ląstelių gamyklayra užterštos, daugumą jų sunku tvarkyti.Jei užterštos ląstelės vertingos ir jas sunku vėl gauti, joms pašalinti galima naudoti šiuos metodus.

1. Vartoti antibiotikus

Antibiotikai veiksmingiau naikina bakterijasląstelių gamyklos.Kombinuoti vaistai yra veiksmingesni nei vieni vaistai.Prevenciniai vaistai yra veiksmingesni nei vaistai po užkrėtimo.Profilaktikai paprastai naudojamas dvigubas antibiotikas (penicilinas 100 u/ml plius streptomicinas 100 µg/ml).Po užteršimo valymo būdas turi būti 5–10 kartų didesnis nei įprastas kiekis.Vaistas turi būti vartojamas 24–48 valandas po pridėjimo, o po to pakeistas įprasta tvarka.Kultūros skystis.Šis metodas gali būti veiksmingas ankstyvosiose užteršimo stadijose.Be penicilino ir streptomicino, naudojami antibiotikai taip pat gali būti gentamicinas, kanamicinas, polimiksinas, tetraciklinas, nistatinas ir kt. Dažniausiai naudojami 400–800 μg/mL kanamicino arba 200 μg/mL tetraciklino.Terpė keičiama kas 2–3 dienas ir perduodama gydymui 1–2 kartoms.Pastaraisiais metais buvo pranešta, kad 4-fluoro, 2-hidroksichinolino (Ciprofloxacin, Cip), Pleu-romutilino darinio (Pleu-romutilino darinio, BM-Cyclin2: BM-1 ir tetraciklino darinio (BM-2)) antibiotikai yra veiksmingai naikina mikoplazmą, kai naudojamas vienas arba kartu.Visi šie trys antibiotikai paruošiami į 250 kartų koncentruotus PBS tirpalus ir laikomi -20 °C temperatūroje vėlesniam naudojimui.Vartojimo koncentracija Cip yra 10 μg/mL, BM-1 – 10 μg/mL, o BM-2 – 5 μg/mL.Kai naudojate, pirmiausia išsiurbkite užterštą auginimo terpę, įpilkite RPMI1640 auginimo terpės, kurioje yra BM-1, tada po 3 dienų išsiurbkite auginimo terpę, įpilkite RPMI1640 auginimo terpės, kurioje yra BM-2, ir kultivuokite 4 dienas ir taip toliau 3 dienas iš eilės. .raundų, kol 33258 fluorescencine dažymo mikroskopu neįrodoma, kad mikoplazma pašalinta, tada 3-4 kartus pridedama normalios auginimo terpės kultivavimui ir pasėjimui.

Kaip išvalyti taršą ląstelių gamykloje1

2. Šildymas

Inkubuojant užterštą audinių kultūrą 41 °C temperatūroje 18 valandų, mikoplazma gali žūti, tačiau ląstelėms daromas neigiamas poveikis.Todėl prieš gydymą reikia atlikti preliminarų tyrimą, kad būtų ištirtas kaitinimo laikas, kuris gali maksimaliai sunaikinti mikoplazmą ir turėti mažiausiai įtakos ląstelėms.Šis metodas kartais yra nepatikimas.Jei iš pradžių bus gydoma vaistais, o po to kaitinama iki 41°C, poveikis bus geresnis.

3. Naudokite mikoplazmai būdingą serumą

Užterštumą mikoplazma galima pašalinti naudojant 5% triušio mikoplazmos imuninį serumą (hemagliutinacijos titras 1:320 arba didesnis).Kadangi specifinis antikūnas gali slopinti mikoplazmos augimą, jis tampa neigiamas praėjus 11 dienų po gydymo antiserumu ir išlieka neigiamas po 5 mėnesių.yra neigiamas.Tačiau šis metodas yra varginantis ir ne toks patogus bei ekonomiškas kaip antibiotikų naudojimas.

4. Kiti metodai

Be aukščiau paminėtų užteršimo pašalinimo metodų, taip pat yra gyvūnų inokuliavimo ir sterilizavimo metodai, makrofagų fagocitozės metodai, bromouracilo įdėjimo į užkrėstus metodus.kultūros buteliaiir tada apšvitinti juos šviesa, ir filtravimo metodais ir pan., bet jie visi yra varginantys ir neefektyvesni.Todėl užsikrėtus mikoplazma, nebent ji yra ypač svarbi, ji paprastai išmetama ir iš naujo auginama.

susisiekite su Whatsapp & Wechat: +86 180 8048 1709


Paskelbimo laikas: 2023-10-24