Po mechaninės ląstelių suspensijos lizės yra daug ląstelių fragmentų.Kaip pašalinti šiuos fragmentus?Pažvelkime į įvairius metodus:

1. Naudokite praskiedimo metodą.Atskiedus ląsteles, jos taip pat gali daugintis, jų daugės, o ląstelių nuolaužų atitinkamai mažės.
2. Taip pat yra natūrali gyvenvietė.Ląstelės nusėda greičiau nei dauguma fragmentų: : Perkelkite ląstelių suspensiją įcentrifugos vamzdelis, ir kai dauguma ląstelių nuskendo, viršutinį tirpalą galima išsiurbti, o po to įpilti į kultūros tirpalą, kad ląstelės sustabdytų.Šis metodas gali būti naudojamas pakartotinai, o kiekvieną kartą po mikroskopu galite stebėti, ar jis atitinka jūsų reikalavimus.
3. Mažo greičio centrifugagali pašalinti šiukšles, paprastai 700 g, 5 min
4. Centrifuguojant, su sąlyga, kad ląstelių skaičius yra pakankamas, sumažinkite centrifugavimo laiką, pvz., 5 min., 1000 aps./min., o ne 3 min, 1000 aps./min., ir pašalinkite supernatantą, nes nekrozė ir šiukšlės paprastai yra supernatante!Šią operaciją reikia atlikti tik vieną kartą plovimo proceso metu prieš inkubaciją!

Nors yra daug būdų pašalinti ląstelių liekanas, pastebėsite, kad centrifugavimas yra vienas iš efektyviausių būdų!

Kadangi augalų audiniai ir ląstelės turi ląstelių sieneles, sudarytas iš celiuliozės, hemiceliuliozės ir pektino, norint pasiekti tikslą, paprastai reikia sumalti kvarcinį smėlį arba stiklo miltelius atitinkamu ekstrahavimo tirpalu arba apdoroti celiulaze.Bakterijų ląstelių suskaidymas yra sunkesnis, nes visas bakterijų ląstelės sienelės skeletas iš tikrųjų yra kovalentinis peptidoglikano cistinių makromolekulių ryšys, labai tvirtas.Įprasti bakterijų ląstelių sienelių sulaužymo būdai yra ultragarsinis smulkinimas, smėlio šlifavimas, aukšto slėgio ekstruzija arba apdorojimas lizocimu.Sulaužius audinį ir ląsteles, parenkamas atitinkamas buferis norimam baltymui išgauti.Netirpios medžiagos, tokios kaip ląstelių fragmentai, pašalinamoscentrifugaarba filtravimas.

susisiekite su Whatsapp & Wechat: +86 180 8048 1709